Фармацевтическая композиция для профилактики пролиферативной клеточной реакции «Митомицин-О»


Разработана фармацевтическая композиция «Митомицин-О» для профилактики пролиферативной клеточной реакции в офтальмологии. На донорских глазах показано, что фармацевтическая композиция в большей степени обладает дозированным локальным эффектом в сравнении с целлюлозной губкой, пропитанной раствором Митомицина-С (ММС). Применение фармацевтической композиции позволяет на 35% уменьшить зону воздействия ММС после фоторефракционной кератэктомии и на 18% — в хирургии глаукомы.

Pharmaceutical composition for the prevention of proliferative cellular response «Mitomycin-O»

Pharmaceutical composition «Mitomycin-O» for the prevention of proliferative cellular response in ophthalmology was developed. In the eyes of the donor shows that the pharmaceutical composition to a greater degree of dose has a local effect in comparison with cellulose sponge soaked in a solution of mitomycin C (MMC). The use of a pharmaceutical composition allows for 35% reduction in the impact zone after photorefractive keratectomy MMC and on 18% — in glaucoma surgery.

Одной из основных проблем в офтальмологии является пролиферативный процесс, развивающийся в ответ на хирургическое вмешательство. Пролиферация тканей — основа восстановления в постоперационном периоде. Однако избыточная пролиферация создает больше проблем для восстановления структур глаз, чем ее недостаток. В хирургии глаукомы пролиферация тканей в зоне хирургически сформированных путей оттока приводит к повышению внутриглазного давления. Основная причина гипертензии обусловлена субконъюнктивальным фиброзом, в то время как блок внутренних отделов, нового пути оттока внутриглазной жидкости относится к вторичным факторам, развивающимся впоследствии [1]. В рефракционной хирургии одним из осложнений является субэпителиальное помутнение стромы роговицы, получившее название «хейз» или «флер». От истинных помутнений роговицы «хейз» отличается, в первую очередь, доброкачественным течением: достигая максимальной интенсивности в течение первых месяцев, он претерпевает спонтанное обратное развитие, сохраняясь лишь в 1,3-6% случаев [2]. По данным конфокальной микроскопии, «хейз» развивается в результате отложения гликозаминогликанов, синтеза коллагена, пролиферации и миграции активированных кератоцитов в поверхностные слои стромы в зоне фотоабляции, то есть представляет собой субэпителиальный фиброз [3].

Применение цитостатических препаратов произвело революцию в лечении целого ряда глазных болезней. Наиболее применяемым препаратом из группы цитостатиков в настоящее время является Митомицин-С (ММС) (международное непатентованное название Mitomycin) [4]. ММС — противоопухолевый антибиотик, нарушающий образование связей между аминокислотами аденином и гуанином при синтезе цепи ДНК, поэтому к препарату более всего чувствительны быстро делящиеся клетки (опухоли, пролиферирующие фибробласты). С целью профилактики пролиферативного процесса офтальмологи активно применяют 0,02%-ный раствор ММС в хирургии глаукомы [5], птеригиума [6], рефракционной хирургии [7]. Помимо положительных качеств ММС известен своей токсичностью. Попав на лимб, ММС не только может замедлить процесс эпителизации роговицы [8], но также вызвать повреждение эндотелия сосудов [9], что увеличивает риск послеоперационных осложнений. В литературе описаны местные побочные эффекты применения высоких концентраций ММС (0,04% и выше) такие как отек, лизис, перфорация роговицы и склеры, ирит, вторичная глаукома [10]. Как правило, это вопрос дозировки и локализации действия препарата.

Известны различные способы ограничения зоны воздействия ММС на ткани глаза. Самым распространенным является использование целлюлозной губки [11]. Однако предлагаемый метод не гарантирует локального воздействия ММС, что может привести к развитию послеоперационных осложнений и, как следствие, недостижение конечного результата хирургического лечения. С этой целью на базе Самарского государственного университета, нами разработана фармацевтическая композиция «Митомицин-О», содержащая Митомицин-С, хлорид натрия и воду для инъекций, а также дополнительно в качестве загустителя — микрокристаллическую целлюлозу 101 (МКЦ). МКЦ — белый порошок без вкуса и запаха, состоящий из пористых агломерированных частиц размером 50 мкм (заявка на изобретение № 2012105183 от 14.02.2012 г.).


Цель исследования — сравнить локальный эффект фармацевтической композиции «Митомицин-О» и целлюлозной губки, пропитанной раствором ММС.

Материал и методы. Экспериментальное исследование выполнено на 4 донорских кадаверных глазах, полученных из глазного банка Самарской областной клинической офтальмологической больницы им. Т.И. Ерошевского, которые по разным причинам не могли быть использованы в клинике. До момента выполнения эксперимента донорский материал сохранялся во влажной камере, срок консервации не более 24 часов. Для точной визуализации фармацевтическую композицию «Митомицин-О» и раствор ММС дополнительно прокрасили флюоресцеином. Эксперимент проводился в 2 группах.

В группе А выполнена фоторефракционная кератэктомия. Ножом для ФРК с поверхности роговицы произвели механическое удаление эпителия, округлой формы диаметром 10-11 мм. Эксимерлазерное воздействие выполняли на установке «Allegro WAVE Eye-Q», с диаметром оптической зоны6,5 мм, диаметром абляции9,0 мм, глубиной — 120 мкм. В первом случае после эксимерлазерного воздействия анатомическим пинцетом на строму роговицы на 2 минуты накладывали целлюлозную губку диаметром9 мм, пропитанную 0,02% раствором ММС, с последующим промыванием зоны аппликации 20 мл 0,9% NaCl. Во втором — стеклянной глазной палочкой на строму роговицы на 2 минуты накладывали фармацевтическую композицию «Митомицин-О» диаметром9 ммс последующим промыванием зоны аппликации 20 мл 0,9% NaCl.

В группе Б анализ провели на этапе выполнения антиглаукомной операции. После формирования поверхностного склерального лоскута на обнажившиеся глубокие слои склеры в первом случае прикладывали целлюлозную губку размером 2Х2 мм, пропитанную раствором ММС, со временем экспозиции 2 минуты и с последующим промыванием зоны аппликации 20 мл 0,9% NaCl. Во втором случае использовали фармацевтическую композицию «Митомицин-О» со временем экспозиции 2 минуты и с последующим промыванием зоны аппликации 20 мл 0,9% NaCl.


Общую площадь прокрашенных флюоресцеином тканей глаза считали по фотографиям, сделанным в группе А — с 16-, в группе Б — с 25-кратным увеличением микроскопа. В графическом редакторе на фотографии накладывали сетку из 100 ячеек и проводили подсчет ячеек, в которые попали окрашенные ткани глаза.

Результаты. Фармацевтическая композиция «Митомицин-О» после смешивания компонентов обладает кашицеобразной консистенцией и не изменяется в течение 7 минут (рис. 1).

Рисунок 1. Фармацевтическая композиция «Митомицин-О», окрашенная флюоресцеином

Фармацевтическая композиция для профилактики пролиферативной клеточной реакции «Митомицин-О»

Макроскопический анализ показал прокрашивание тканей глаза флюоресцеином в обеих группах. Группа А: в первом случае наблюдали растекание раствора, прокрасились зона эксимерлазерного воздействия, интактная зона роговицы, лимб и конъюнктива, площадь прокрашивания — 49% (рис. 2).

Рисунок 2. Донорский глаз, группа А, зона распространения раствора Митомицина-С при использовании целлюлозной губки, площадь прокрашивания — 49%

 Фармацевтическая композиция для профилактики пролиферативной клеточной реакции «Митомицин-О»

 

Во втором случае фармацевтическая композиция «Митомицин-О» располагалась строго в заданной зоне, прокрасилась только деэпителизированная поверхность роговицы, площадь прокрашивания — 14% (рис. 3).

Рисунок 3. Донорский глаз, группа А, зона распространения фармацевтической композиции «Митомицин-О», площадь прокрашивания — 14%

Фармацевтическая композиция для профилактики пролиферативной клеточной реакции «Митомицин-О»

После промывания зоны аппликации физиологическим раствором компонентов фармацевтической композиции нами не обнаружено. Группа Б: в первом случае произошло растекание раствора, прокрашены лимб, конъюнктива, поверхностные и глубокие слои склеры, площадь прокрашивания — 27% (рис. 4).

Рисунок 4. Донорский глаз, Группа Б, зона распространения раствора Митомицина-С при использовании целлюлозной губки, площадь прокрашивания — 27%

Фармацевтическая композиция для профилактики пролиферативной клеточной реакции «Митомицин-О»

Во втором случае фармацевтическая композиция «Митомицин-О» располагалась строго в зоне сформированного склерального ложа, прокрасились только глубокие слои склеры, площадь прокрашивания — 9% (рис. 5). После промывания зоны аппликации физиологическим раствором компонентов фармацевтической композиции нами не обнаружено.

Рисунок 5. Донорский глаз, Группа Б, зона распространения раствора Митомицина-С при использовании целлюлозной губки, площадь прокрашивания — 9%

Фармацевтическая композиция для профилактики пролиферативной клеточной реакции «Митомицин-О»

Выводы

1. Фармацевтическая композиция «Митомицин-О» обладает строго дозированным локальным эффектом в сравнении с целлюлозной губкой пропитанной раствором ММС.

2. Применение «Митомицин-О» позволит после фоторефракционной кератэктомии на 35%, а в хирургии глаукомы на 18% уменьшить зону воздействия ММС.

 

К.Н. Руссков, А.В. Золотарев, Е.С. Милюдин 

Самарская областная клиническая офтальмологическая больница им. Т.И. Ерошевского 

Руссков Константин Николаевич — врач-офтальмолог

 

 

Литература:

1. Molteno A.C. New implant for drainage glaucoma. Animal trial // Br J Ophthalmology. — 1969. — № 53. — Р. 161-168.

2. Румянцева О.А., Ухина Т.В. Изучение патогенеза гиперплазии эпителия и регресса рефракции после фоторефракционной хирургии // Клиническая офтальмология. — Т. 1, № 4. — С. 101-104.

3. Куренков В.В. Эксимерлазерная хирургия роговицы. — М., Медицина. — 1998. — С. 134-138.

4. Beretta G. Mitomycin C // Turin, Edizioni Minerva Medica. — 2001. — Р. 215-238.

5. Palmer S.S. Mitomycin as adjunct chemotherapy with trabeculectomy // Ophthalmology. — 1991. — № 98. — Р. 317-321.

6. Wong V.A., MD, Law F.C.H., MD, FRCSC. Use of Mitomycin C with Conjunctival Autograft in Pterygium Surgery in Asian-Canadians // Ophthalmology. — 1999. — № 106. — P. 1512-1515.

7. Majmudar P.A., Forstot L.S., Dennis R.F. et al. Topical Mitimycin-C for Subepithelial Fibrosis after Refractive Corneal Surgery // Ophtalmology. — 2000. — № 107. — Р. 89-94.

8. Madhavan S. R. Cellular effects of mitomycin-C on human corneas after photorefractive keratectomy // J Cataract Refract Surg. — 2006. — № 32. — Р. 1741-1747.

9. Smith S., D’Amore P.A., Dreyer E.B. Comparative toxicity of mitomycin C and 5-fluorouracil in vitro // Am J Ophthalmol. — 1994. — Р. 118:332-7.

10. Dougherty P.J., Hardten D.R., Lindstorm R.L. Corneoscleral melt after pterygium surgery using a single intraoperative application of mitomycin-C // Cornea. — 1996. — № 15. — Р. 537-540.

11. Khoury J.M., Farah T., El-Haibi C.P. et al. Corneal light shield as a delivery system for standardized application of mitomycin C in excimer surface ablation // J Refract Surg. — 2007. — № 23. — Р. 716-9.