Проба на совместимость перед переливанием компонентов крови. Технология выполнения. Пособие для врачей./ГОУ ДПО КГМА Росздрава. — Казань, 2011. — 35 с.
В пособии представлены технологии выполнения проб на индивидуальную совместимость перед переливанием донорских компонентов крови в целях предотвращения посттрансфузионных осложнений гемолитического типа. Приведены требования к образцам крови, к специалистам, проводящим пробы, а также порядок проведения проб в зависимости от вида переливаемой трансфузионной среды и особенности проведения проб у отдельных категорий пациентов.
Пособие содержит перечень оборудования и реагентов, необходимых для проведения проб на индивидуальную совместимость.
Предназначено для врачей всех специальностей, проводящих гемотрансфузионную терапию. Может быть использовано при подготовке специалистов в высших и средних медицинских образовательных учреждениях.
Учебное пособие утверждено и рекомендовано к изданию Методическим советом ГОУ ДПО КГМА Росздрава от «_____» __________2011 г. (протокол № _____).
С учебным пособием можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ДПО КГМА Росздрава по адресу 420012, г. Казань, ул. Муштари, д. 11
Введение. Целью проведения проб на индивидуальную совместимость является предотвращение трансфузий несовместимых компонентов крови. Под совместимостью понимается благоприятное сочетание крови донора и реципиента. Биологически невозможное их сочетание по антигенам и антителам различных групповых систем определяет несовместимость крови донора и реципиента.
Группа крови АВО — это набор групповых антигенов А и В и естественных анти-А, анти-В антител, который наследственно детерминирован и не меняется в течение жизни.
Система Резус — одна из наиболее полиморфных антигенных систем эритроцитов человека. Она включает около 50 серологически различных антигенов, не считая слабых, переходных и парциальных форм. На эритроцитах человека имеются 5 основных антигенов системы Резус (D, C, c, E, e). Наибольшее клиническое значение имеет антиген D. Обладая выраженными иммуногенными свойствами, антиген D в 95% является причиной гемолитической болезни новорожденного, а также причиной тяжёлых посттрансфузионных осложнений. Лиц, имеющих антиген D, относят к резус положительным (Rh+), не имеющих антиген D относят к резус отрицательным (Rh-).
В настоящее время известно более 236 антигенов эритроцитов, которые распределяются в 29 генетически независимых системах. Первостепенное клиническое значение имеют антигены систем АВО и Резус. Эритроцитарные системы Kell, MNS, Levis, Duffi, Kidd имеют меньшее практическое значение, так как они сравнительно редко вызывают сенсибилизацию. Эти системы становятся значимыми при многократных гемотрансфузиях эритроцитной массы, повторных беременностях. Антитела ко всем этим антигенам могут образоваться у человека любой группы крови системы АВО, Резус (независимо от резус-принадлежности). Они образуются при тех же условиях, что и антитела анти-D (многократные гемотрансфузии эритроцитной массы, повторные беременности) и могут служить причиной посттрансфузионных осложнений гемолитического типа и гемолитической болезни новорожденных. Если реципиенту, в крови которого имеются антитела, перелить кровь донора, эритроциты которого содержат антигены, против которых направлены антитела, такая кровь будет разрушаться в организме реципиента, т.е. она является для него несовместимой.
В настоящем пособии представлена технология выполнения проб на индивидуальную совместимость, приведены требования к образцам крови, к специалистам, проводящим пробы, а также порядок проведения проб в зависимости от вида переливаемой трансфузионной среды и особенности проведения проб у отдельных категорий пациентов.
Технология выполнения проб на совместимость перед переливанием компонентов крови:
1. Характеристика методики выполнения проб на совместимость перед переливанием компонентов крови
1.1. Требования к образцам крови
Перед процедурой забора крови на проведение проб на совместимость у реципиента уточняют его фамилию, имя и отчество. Берут сухую чистую пробирку, на которую наносят следующую информацию о пациенте: Ф.И.О., дату забора крови, для стационарных больных — номер медицинской карты. Кровь пациента забирают из вены в количестве 3-5 мл и переносят в подписанную пробирку. Для получения сыворотки пробирку с образцом крови оставляют при комнатной температуре не менее чем на 1 час или, в экстренных случаях, центрифугируют в лабораторной центрифуге при скорости 1500-2000 об/мин. в течение 5 минут. Используют образец крови реципиента, хранившийся при t+20С…+80С не более двух дней.
Гемолизированная кровь для исследований не используется. При наличии гемолиза процедуру взятия крови повторяют.
Предтрансфузионный образец крови реципиента хранят при температуре +20С…+80С в течение 5 суток. Это необходимо для дальнейшего исследования крови реципиента в специализированной лаборатории службы крови при возникновении посттрансфузионного осложнения.
В случае возникновения посттрансфузионного осложнения предтрансфузионный образец крови реципиента и остатки трансфузионной среды направляют в специализированную лабораторию службы крови для исследования.
1.2. Требования к помещению
Иммуногематологические исследования проводят в помещении с естественным освещением, температура воздуха в помещении должна быть в пределах +150С …+250С.
1.3. Общие требования к проведению проб на совместимость
Перед трансфузией компонентов крови проводят пробы на индивидуальную совместимость по системам АВО и Резус, и биологическую пробу.
При проведении проб на индивидуальную совместимость по системе АВО выявляется и совместимость по системе MNS, а при проведении проб на индивидуальную совместимость по системе Резус выявляется совместимость и по другим клинически значимым системам групп крови (Kell, MNS, Levis, Duffi, Kidd).
Пробы на совместимость непосредственно перед каждой трансфузией проводит врач, производящий трансфузию консервированной крови и её компонентов, после контрольного переопределения групповой принадлежности крови реципиента и донора, и контрольного переопределения резус — принадлежности крови реципиента. Экстренность трансфузии не освобождает от проведения проб на совместимость.
1.4. Требования к объемам исследований, в зависимости от вида переливаемой трансфузионной среды
1.4.1. Переливание переносчиков газов крови
Перед переливанием переносчиков газов крови проводят пробы на индивидуальную совместимость крови реципиента и донора, в том числе аутодонора, по системам АВО и Резус, а также биологическую пробу после проведения контрольных исследований групповой и резус-принадлежности крови пациента и групповой принадлежности эритроцитов донора (аутодонора).
Пробы на совместимость по группам крови АВО и Резус проводят отдельно, они не могут заменить друг друга, так как антитела разного характера требуют разных методик для своего выявления.
Пробу на индивидуальную совместимость по системе АВО проводят по одной из следующих методик: проба на совместимость на плоскости при комнатной температуре или в гелевом тесте.
Пробу на индивидуальную совместимость по системе Резус проводят по одной из следующих методик: проба с применением 33% раствора полиглюкина, проба с применением 10% раствора желатина или в гелевом тесте.
1.4.2. Переливание корректоров гемостаза и фибринолиза, средств коррекции иммунитета
Перед переливанием корректоров гемостаза и фибринолиза, средств коррекции иммунитета крови проводят биологическую пробу.
1.5. Требования к специалистам
Проведение проб на индивидуальную совместимость проводят специалисты, имеющие подготовку по вопросам иммуногематологии на специализированных циклах усовершенствования на базе учреждений дополнительного профессионального образования и (или) на базе учреждений службы крови Республики Татарстан (см. таблицу 1).
Таблица 1
Требования к специалистам для выполнения проб на совместимость перед переливанием компонентов крови
Медицинское учреждение | Выполнение проб на совместимость перед переливанием компонентов крови | Медицинский персонал | Дополнительные требования к медицинскому персоналу |
Стационар, в том числе дневной стационар, в амбулаторно-поликлинических условиях | Перед каждым переливанием крови и её компонентов | Врач, непосредственно проводящий трансфузию | Должны иметь специальную подготовку по вопросам иммуногематологии на специализированных циклах усовершенствования на базе учреждений дополнительного профессионального образования и (или) на базе учреждений службы крови РТ не реже одного раза в 5 лет |
2. Материальные ресурсы
Для выполнения проб на совместимость перед переливанием компонентов крови должно быть оснащено отдельное место (или специальное помещение), которое оборудуется согласно требованиям приказа МЗ РФ №2 от 09.01.1998 г. «Об утверждении инструкций по иммуносерологии».
2.1 Приборы, инструменты, изделия медицинского назначения
Таблица 2
Приборы, инструменты, изделия медицинского назначения, необходимые для выполнения проб на совместимость, а также альтернативные приборы и изделия медицинской техники.
Наименование прибора, изделия | Количество приборов, | Альтернативный прибор, изделие медицинской техники |
Проба на совместимость по группам крови системы АВО (на плоскости) | ||
Стол лабораторный | 1 шт. | Стол с покрытием из пластика |
Стул | 1 шт. | |
Настольная лампа | 1 шт. | Настенная лампа |
Планшеты для иммуногематологических исследований | 1 шт. на 1 исследование | Тарелка белого цвета фарфоровая или эмалированная |
Пипетка Пастера | 1 шт. | Автоматическая пипетка переменного объёма (20-200 мкл) |
Стеклянные палочки (лопаточки) | От 1 до 10 шт. | Палочка из пластмассы |
Песочные часы на 5 минут | 1 шт. | Секундомер |
Лупа с 4-6-кратным увеличением | 1 шт. | |
Штатив лабораторный на 10 гнёзд | 1 шт. | |
Стеклянные стаканы | 2 шт. | Стеклянные баночки |
Центрифуга лабораторная ОПН-3 | 1 шт. | Центрифуга лабораторная СМ-6 М, ELMI |
Проба на совместимость по системе Резус с применением 33% раствора полиглюкина (в пробирке) | ||
Стол лабораторный | 1 шт. | Стол с покрытием из пластика |
Стул | 1 шт. | |
Настольная лампа | 1 шт. | Настенная лампа |
Пробирка центрифужная | 1 шт. | Пробирка биологическая |
Пипетка Пастера | 1 шт. | Автоматическая пипетка переменного объёма (20-200 мкл) |
Песочные часы на 5 минут | 1 шт. | Секундомер |
Лупа с 4-6-кратным увеличением | 1 шт. | |
Штатив лабораторный на 10 гнёзд | 1 шт. | |
Стеклянные стаканы | 2 шт. | Стеклянные баночки |
Центрифуга лабораторная ОПН-3 | 1 шт. | Центрифуга лабораторная СМ-6 М, ELMI |
Проба на совместимость по системе Резус с применением 10% раствора желатина (в пробирке) | ||
Стол лабораторный | 1 шт. | Стол с покрытием из пластика |
Стул | 1 шт. | |
Настольная лампа | 1 шт. | Настенная лампа |
Баня водяная на 46-48 0С | 1 шт. | Термостат на 46-480С |
Пипетка Пастера | 1 шт. | Автоматическая пипетка переменного объёма (20-200 мкл) |
Пробирки тонкостенные (вместимостью не менее 10 мл) | 1 шт. | Пробирка центрифужная |
Песочные часы на 15 минут | 1 шт. | Секундомер |
Лупа с 4-6-кратным увеличением | 1 шт. | |
Штатив лабораторный на 10 гнёзд | 1 шт. | |
Стеклянные стаканы | 2 шт. | Стеклянные баночки |
Центрифуга лабораторная ОПН-3 | 1 шт. | Центрифуга лабораторная СМ-6 М, ELMI |
Проба на совместимость по системе АВО и системе Резус с использованием гелевых диагностических карт | ||
Стол лабораторный | 1 шт. | Стол с покрытием из пластика |
Стул | 1 шт. | |
Настольная лампа | 1 шт. | Настенная лампа |
Автоматическая пипетка переменного объёма | 5-40 мкл 1 шт. 100-1000 мкл 1 шт. | |
Штатив лабораторный на 10 гнёзд | 1 шт. | |
Стеклянные стаканы | 2 шт. | Стеклянные баночки |
Центрифуга лабораторная ОПН-3 | 1 шт. | Центрифуга лабораторная СМ-6 М, ELMI |
Центрифуга для гелевых карт | 1 шт. | |
Инкубатор на 370С | 1 шт. | Термостат на 370С |
Пробирка центрифужная | 1 шт. | Пробирка биологическая |
2.2. Реактивы
Для выполнения проб на индивидуальную совместимость перед трансфузией крови и её компонентов необходимы реактивы, которые представлены в таблице 3.
Таблица 3
Реагенты, необходимые для постановки проб на совместимость
Наименование реактива | Документ, регламенти-рующий использование | Количество реактива, необходимое для выполнения | Сроки и особенности хранения реактива, работы с ним* | |
Проба на совместимость по системе АВО на плоскости при комнатной температуре | ||||
Раствор натрия хлорида, 0,9% | Приказ МЗ РФ от 25.11.2002 №363 «Об утверждении Инструкции по применению компонентов крови» | 1-2 капли (50-100 мкл) | Хранится при t+15…+25 0С. | |
Проба на совместимость с использованием 33 % раствора полиглюкина | ||||
Раствор полиглюкина, 33,0% | Приказ МЗ РФ от 25.11.2002 №363 «Об утверждении Инструкции по применению компонентов крови» | 1 капля (50 мкл) | Хранится при t+18…+20 0С | |
Раствор натрия хлорида, 0,9% | 3-5 мл | Хранится при t+15…+25 0С | ||
Проба на совместимость с использованием 10 % раствора желатина | ||||
Раствор желатина, 10,0% | Приказ МЗ РФ от 25.11.2002 №363 «Об утверждении инструкции по применению компонентов крови» | 2 капли (100 мкл) | Хранится при t+2…+8 0С | |
Раствор натрия хлорида, 0,9% | 3-5 мл | Хранится при t+15…+25 0С | ||
Проба на совместимость по системе АВО и системе Резус с использованием гелевых диагностических карт | ||||
Диагностические карточки Coombs+ Neutral | Инструкции, прилагаемые к диагностическим карточкам | От 1/4 до 1/3 шт,. в зависимости от используемой диагностической карты. | Хранится при t+15…+25 0С. | |
Раствор для приготовления суспензии исследуемых эритроцитов | Инструкция, прилагаемая к раствору | От 0,5 до 1,0 мл, в зависимости от производителя | Хранится при t+2…+8 0С. | |
* — Температура внутри холодильной камеры, где хранятся реактивы, контролируется средним медработником дважды в день. Показания термометра регистрируются в «Журнале регистрации температурного режима хранения диагностических стандартов для иммуногематологических исследований» (см. приложение 1).
2.3 Прочий расходуемый материал
Для выполнения проб на совместимость перед переливанием компонентов крови используется прочий расходуемый материал (см. таблицу 4).
Таблица 4
Наименование | Количество | Примечание |
Ватно-марлевый тампон | На 1 тампон: вата — 3,0 гр., бинт — 30 см. | Для подсушивания пипетки и стеклянной палочки |
Медицинские перчатки одноразовые | 1 пара на каждые 3 часа работы | Заменить немедленно при нарушении целостности или сильном загрязнении. |
Раствор натрия хлорида, 0,9% | 0,5 л | Для промывания пипеток и палочек |
Спирт этиловый медицинский, 70,0% | 3,0 гр. на 1 обработку | Для обработки рук персона-ла после окончания работы |
Дезинфицирующий раствор | В соответствии с методичес-кими указаниями по приме-нению дез. средств, разре-шённых к использованию в РФ и РТ | Для дезинфекции биологического материала, лабораторной посуды и рабочего места. |
Наконечники для автомати-ческих пипеток переменного объема, одноразовые | 4 шт. на 1 исследование |
3. Порядок проведения проб на совместимость
Целью проведения проб на совместимость является предотвращение трансфузии консервированной крови и её компонентов, несовместимых с кровью реципиента. Для проб на совместимость используют сыворотку крови реципиента и образец крови донора.
Если больному переливается консервированная кровь и её компоненты из нескольких контейнеров, пробы на совместимость проводят с каждым контейнером, даже если на них обозначено, что компоненты крови получены от одного и того же донора.
3.1 Пробы на индивидуальную совместимость по системе АВО
3.1.1 Проба на совместимость по группам крови системы АВО (на плоскости)
Порядок проведения исследования:
Пробу производят на планшете со смачиваемой поверхностью.
1. Планшет маркируют, для чего указывают Ф.И.О. и группу крови реципиента, Ф.И.О. и группу крови донора и номер контейнера с кровью.
2. Из пробирки с исследуемой кровью реципиента берут осторожно пипеткой сыворотку и наносят на планшет 1 большую каплю (100 мкл).
3. Из сегмента трубки пластикового мешка с трансфузионной средой, которая приготовлена для трансфузии именно этому больному, берут маленькую каплю (10 мкл) донорских эритроцитов и наносят рядом с сывороткой реципиента (соотношение сыворотки и эритроцитов 10:1).
4. Капли перемешивают стеклянной палочкой.
5. Наблюдают за реакцией 5 минут, при постоянном покачивании планшета. По истечении этого времени добавляют 1-2 капли (50-100 мкл) раствора натрия хлорида, 0,9%.
Трактовка результатов реакции:
реакция в капле может быть положительной или отрицательной.
а) положительный результат (+) выражается в агглютинации эритроцитов, агглютинаты видны невооруженным глазом в виде мелких или крупных красных агрегатов. Кровь несовместима, переливать нельзя! (см. рисунок 1).
Рисунок 1. Кровь реципиента и донора несовместима
б) при отрицательном результате (-) капля остаётся гомогенно окрашенной в красный цвет, агглютинаты в ней не обнаруживаются. Кровь донора совместима с кровью реципиента (см. рисунок 2).
Рисунок 2. Кровь донора совместима с кровью реципиента
3.2. Пробы на индивидуальную совместимость по системе Резус
3.2.1. Проба на совместимость с использованием 33 % раствора полиглюкина
Порядок проведения исследования:
1. Для исследования берут пробирку (центрифужную или любую другую, вместимостью не менее 10 мл). Пробирку маркируют, для чего указывают Ф.И.О. и группу крови реципиента, и Ф.И.О донора, номер контейнера с кровью.
2. Из пробирки с исследуемой кровью реципиента осторожно берут пипеткой сыворотку и вносят 2 капли (100 мкл) на дно пробирки.
3. Из сегмента трубки пластикового мешка с трансфузионной средой, которая приготовлена для трансфузии именно этому больному, берут одну каплю (50 мкл) донорских эритроцитов вносят в эту же пробирку, добавляют 1 каплю (50 мкл) 33% раствора полиглюкина.
4. Содержимое пробирки перемешивают путём встряхивания и затем медленно поворачивают по оси, наклоняя почти до горизонтального положения так, чтобы содержимое растекалось по ее стенкам. Эту процедуру выполняют в течение пяти минут.
5. Через пять минут в пробирку добавляют по 3-5 мл физ. раствора. Содержимое пробирок перемешивают 2-3-кратным перевертыванием пробирок (не встряхивая!)
Трактовка результатов реакции:
результат учитывают, просматривая пробирки на свет невооружённым глазом или через лупу.
Если в пробирке наблюдается агглютинация в виде взвеси мелких или крупных красных комочков на фоне просветлённой или полностью обесцвеченной жидкости, значит, кровь донора не совместима с кровью реципиента. Переливать нельзя!
Если в пробирке равномерно окрашенная, слегка опалесцирующая жидкость без признаков агглютинации эритроцитов — это значит, что кровь донора совместима с кровью реципиента в отношении антигенов системы Резус и другими клинически значимыми системами (см. рисунок 3).
Рисунок 3. Результаты исследования проб на совместимость по системе Резус (с использованием 33% раствора полиглюкина и 10% раствора желатина)
3.2.2. Проба на совместимость с использованием 10 % раствора желатина
Раствор желатина необходимо тщательно просмотреть перед употреблением. При помутнении или появлении хлопьев, а также при потере свойств застудневания при t+4 0С…+8 0С желатин непригоден.
Порядок проведения исследования:
1. Для исследования берут пробирку (ёмкость не менее 10 мл). Пробирку маркируют, для чего указывают Ф.И.О., группу крови реципиента и донора, номер контейнера с кровью.
2. Из сегмента трубки пластикового мешка с трансфузионной средой, которая приготовлена для трансфузии именно этому больному, берут одну каплю (50 мкл) донорских эритроцитов, вносят в пробирку, добавляют 2 капли (100 мкл) 10% раствора желатина, прогретого на водяной бане до разжижения при температуре +46 0С…+48 0С. Из пробирки с кровью реципиента осторожно берут пипеткой сыворотку и вносят 2 капли (100 мкл) на дно пробирки.
3. Содержимое пробирки встряхивают для перемешивания и помещают на водяную баню (t+46 0С…+48 0С) на 15 минут или в термостат (t+460С…+480С) на 45 минут.
4. После окончания инкубации пробирку извлекают, добавляют 5-8 мл физ. раствора, содержимое пробирки перемешивают путём одно-двукратного перевёртывания и оценивают результат исследования.
Трактовка результатов реакции.
результат учитывают, просматривая пробирки на свет невооружённым глазом или через лупу, а затем просматривают путём микроскопирования. Для этого каплю содержимого пробирки помещают на предметное стекло и просматривают под малым увеличением.
Если в пробирке наблюдается агглютинация в виде взвеси мелких или крупных красных комочков на фоне просветлённой или полностью обесцвеченной жидкости — это значит, что кровь донора несовместима с кровью реципиента и не должна быть ему перелита.
Если в пробирке равномерно окрашенная, слегка опалесцирующая жидкость без признаков агглютинации эритроцитов — это значит, что кровь донора совместима с кровью реципиента в отношении антигенов системы Резус и другим клинически значимым системам (см. рисунок 3).
3.3. Проба на совместимость в гелевом тесте
При постановке в гелевом тесте пробы на совместимость проводятся сразу по системе АВО (в микропробирке Neutral) и проба на совместимость по системе Резус (в микропробирке Coombs).
Порядок проведения исследования:
1. Перед исследованием проверяют диагностические карты. Не используют карты, если в геле имеются взвешенные пузырьки, микропробирка не содержит надосадочной жидкости, наблюдается уменьшение объёма геля или его растрескивание.
2. Микропробирки подписывают (фамилия реципиента и номер донорского образца).
3. Из сегмента трубки пластикового мешка с трансфузионной средой, которая приготовлена для трансфузии именно этому больному, автоматической пипеткой берут 10 мкл донорских эритроцитов, помещают в центрифужную пробирку.
4. Добавляют 1 мл разводящего раствора.
5. Вскрывают необходимое количество микропробирок (по одной микропробирке Coombs и Neutral).
6. Автоматической пипеткой вносят по 50 мкл разведенных донорских эритроцитов в микропробирки Coombs и Neutral.
7. Добавляют в обе микропробирки по 25 мкл сыворотки реципиента.
8. Инкубируют при t+370С 15 минут.
9. После инкубации карточку центрифугируют в центрифуге для гелевых карт (время и скорость задаются автоматически).
Трактовка результатов:
если осадок эритроцитов расположен на дне микропробирки, то проба считается совместимой (см. рисунок 4 №1). Если агглютинаты задерживаются на поверхности геля или в его толще, то проба несовместима (см. рисунок 4 №№2-6).
№1 №2 №3 №4 №5 №6
Рисунок 4. Результаты исследования проб на индивидуальную совместимость по системе Резус гелевой методикой
Для проведения биологической пробы используются подготовленные к трансфузии кровь и её компоненты.
Биологическую пробу проводят независимо от объема гемотрансфузионной среды и скорости ее введения. При необходимости переливания нескольких доз крови и её компонентов биологическую пробу проводят перед началом переливания каждой новой дозы.
Техника проведения:
однократно переливают 10 мл гемотрансфузионной среды со скоростью 2-3 мл (40-60 капель) в минуту, затем переливание прекращают и в течение 3 мин наблюдают за реципиентом, контролируя у него пульс, частоту дыхания, артериальное давление, общее состояние, цвет кожи, измеряют температуру тела. Такую процедуру повторяют еще дважды. Появление в этот период даже одного из таких клинических симптомов, как озноб, боли в пояснице, чувство жара и стеснения в груди, головной боли, тошноты или рвоты, требует немедленного прекращения трансфузии и отказа от переливания данной трансфузионной среды. Образец крови направляют в специализированную лабораторию службы крови для проведения индивидуального подбора эритроцитной массы.
Экстренность трансфузии компонентов крови не освобождает от выполнения биологической пробы. Во время ее проведения возможно продолжение переливания солевых растворов.
При переливании крови и её компонентов под наркозом о реакции или начинающихся осложнениях судят по немотивированному усилению кровоточивости в операционной ране, снижению артериального давления и учащению пульса, изменению цвета мочи при катетеризации мочевого пузыря, а также по результатам пробы на выявление раннего гемолиза. В таких случаях переливание данной гемотрансфузионной среды прекращается, врач-хирург и врач анестезиолог-реаниматолог совместно с врачом-трансфузиологом обязаны выяснить причину гемодинамических нарушений. Если ничто, кроме трансфузии, не могло их вызвать, то данная гемотрансфузионная среда не переливается, вопрос дальнейшей трансфузионной терапии решается ими в зависимости от клинических и лабораторных данных.
Биологическая проба, также как и проба на индивидуальную совместимость, обязательно проводится и в тех случаях, когда переливается индивидуально подобранная в лаборатории или фенотипированная эритроцитная масса или взвесь.
После окончания переливания донорский контейнер с небольшим количеством оставшейся гемотрансфузионной среды, использованной для проведения проб на индивидуальную совместимость, подлежит обязательному сохранению в течение 48 часов при температуре +20С…+80С.
Реципиент после переливания соблюдает в течение двух часов постельный режим и наблюдается лечащим или дежурным врачом. Ежечасно ему измеряют температуру тела, артериальное давление, фиксируя эти показатели в медицинской карте больного. Контролируется наличие и почасовой объем мочеотделения и цвет мочи. Появление красной окраски мочи при сохранении прозрачности свидетельствует об остром гемолизе. На следующий день после переливания обязательно производят клинический анализ крови и мочи.
При амбулаторном проведении гемотрансфузии реципиент после окончания переливания должен находиться под наблюдением врача не менее трех часов. Только при отсутствии каких-либо реакций, наличии стабильных показателей артериального давления и пульса, нормальном мочеотделении пациент может быть отпущен из лечебного учреждения.
3.5. Регистрация результатов проб на совместимость
Результат контрольных исследований проб на совместимость (раздельно по каждому виду) заносят в трансфузионную карту медицинской карты больного (см. приложение 2).
3.6. Индивидуальный подбор
Индивидуальный подбор переносчиков газов крови проводится в учреждениях службы крови (СПК или ОПК) врачом клинической лабораторной диагностики, имеющим специальную подготовку по иммуногематологии на специализированных циклах и на базе учреждений службы крови РТ.
3.6.1. Показания к индивидуальному подбору
- отягощённый трансфузионный анамнез (наличие в анамнезе посттрансфузионных реакций или осложнений на предыдущие трансфузии, многократные трансфузии)
- отягощённый акушерский анамнез (наличие в анамнезе рождения детей с ГБН, мёртворождений, выкидышей на поздних сроках);
- гемолитическая болезнь новорожденных;
- затруднения при определении групповой и/или резус-принадлежности крови пациента,
- положительный или сомнительный результат хотя бы одной из проб на индивидуальную совместимость или биологической пробы;
- наличие изоиммунных антиэритроцитарных антител любой специфичности;
- многократные трансфузии.
3.6.2. Требования к образцам крови, направляемым на индивидуальный подбор
Образец крови для проведения индивидуального подбора забирают в две пробирки:
1 пробирка — с консервантом (3 мл),
2 пробирка- без консерванта (5 мл).
В качестве консерванта используют раствор ЭДТА или раствор цитрата натрия, 5% Соотношение исследуемой крови и консерванта для цитрата натрия — 10:1, для ЭДТА- 100:1.
При необходимости индивидуального подбора, новорожденному ребёнку выделяют две пробирки:
1 пробирка — с образцом крови ребёнка (не менее 1,5 мл),
2 пробирка — с образцом крови матери (5 мл).
Обе пробирки должны быть обязательно подписаны (Ф.И.О., дата забора, № истории болезни).
Направление оформляется согласно приложению № 3.
Индивидуальный подбор переносчиков газов крови является предварительной процедурой. Если эритроцитная масса или взвесь подобраны реципиенту индивидуально в специализированной лаборатории, врач, выполняющий трансфузию, перед переливанием определяет группу крови и резус-принадлежность реципиента, группу крови донора и проводит только одну пробу на совместимость на плоскости при комнатной температуре и в начале трансфузии-биологическую пробу.
3.7. Дополнительные сведения об особенностях выполнения проб на совместимость
Существуют категории реципиентов, у которых встречаются затруднения при проведении проб на индивидуальную совместимость.
Таблица 5
Категории пациентов с затруднениями при проведении проб на индивидуальную совместимость
Категорияпациентов | Индивидуальныеособенности | Характерзатруднения | Способ решенияпроблемы |
Новорожденные | Присутствие в крови новорожденного материнских аллоантител | Несовместимость хотя бы по одной из проб | При положительном результате хотя бы одной из проб образец крови новорожденного и матери направляется в специализированную лабораторию для индивидуального подбора. |
Беременные | Наличие изоиммунных анти-эритроцитарных антител. | Несовместимость хотя бы по одной из проб | Напраляется образец крови реципиента (беременной, роженицы) в специализированную лабораторию для индивидуального подбора. |
Больные с гематологическими или онкологическими заболеваниями, а также пациенты с другими видами патологий (ожоги, цирроз печени, сепсис и др.) | Наличие неспецифических алло- и/или аутоантител | Несовместимость хотя бы по одной из проб | Проведение индивидуальных проб на совместимость в гелевом тесте или направление образца крови реципиента в специализированную лабораторию службы крови для индивидуального подбора. |
У различных категорий пациентов | Наличие анти-А1 антител (экстра агглютинина α1) | Несовместимость по системе АВО | Направление образца крови реципиента в специализированную лабораторию службы крови для индивидуального подбора. |
Массивная гемотрансфузия или трансфузия несовместимых переносчиков газов крови по системе АВО и (или) системе Резус | Сомнительные результаты проб на совместимость | Направление образца крови реципиента в специализированную лабораторию службы крови для индивидуального подбора. | |
Внутривенное введение растворов кровезаменителей. | Сомнительные результаты проб на совместимость | Направление образца крови реципиента в специализированную лабораторию службы крови для индивидуального подбора. |
Приложения
Приложение 1
______________________________ (наименование медицинского учреждения)
ЖУРНАЛ РЕГИСТРАЦИИ ТЕМПЕРАТУРНОГО РЕЖИМА ХРАНЕНИЯ ДИАГНОСТИЧЕСКИХ СТАНДАРТОВ ДЛЯ ИММУНОГЕМАТОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ Начат «____» ______________ 20___ г. Окончен «____» ______________ 20___ г. 1. Журнал ведется отдельно для каждого холодильника, предназначенного для хранения диагностических стандартов. 2. Показания термометра регистрируются ежедневно. 3. Страницы должны быть пронумерованы, прошнурованы, скреплены печатью учреждения и подписью руководителя медицинского учреждения.
|
Дата контроля | Показания термометра | Подпись ответственного лица | Принятые меры | |
Утро | Вечер | |||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Приложение 2
ТРАНСФУЗИОННАЯ КАРТА № ________
Дата трансфузии ___________________
Реципиент: Ф.И.О._____________________________________ АД____________Ps___________Т˚С_____________ Показана трансфузия _________________________ (указать наименование трансфузионной среды) ___________________________________________ Трансфузионный анамнез _____________________ ___________________________________________ Акушерский анамнез _________________________ ___________________________________________ с целью ____________________________________ Результат контрольной проверки группы крови по АВО ____________ Резус __________________ | Донор (ауто): (нужное подчеркнуть) Ф.И.О._____________________________________ Индивидуальный № __________________________ Группа крови по АВО________ Резус___________ (по данным этикетки) Результат контрольной проверки группы крови донора по АВО______________________________ |
Использованы диагностические стандарты:
1)Стандартные изогемагглютинирующие сыворотки АВО или цоликлоны (нужное подчеркнуть) следующих серий:
__________/____________годен до______________ __________/____________годен до______________ | __________/____________годен до______________ __________/____________годен до______________ |
2) Универсальный реагент антирезус Rh0(D) или цоликлон анти-D Супер (нужное подчеркнуть) следующих серий: ________________годен до_______________
Паспорт трансфузионной среды | Результаты проб на совместимость | Перелита трансфузионная среда | |||||
Изготовитель | АВО | Наименование | |||||
Инд. подбор крови | |||||||
Подготовка к переливанию | |||||||
Резус | |||||||
Дата заготовки | Фильтрация | ||||||
Ресуспендирование | |||||||
Способ и скорость трансфузии | |||||||
Биол. проба | Объем | ||||||
Продолжительность трансфузии | с | ||||||
до |
Наблюдение за реципиентом
Ранний посттрансфузионный период | Первые сутки после трансфузии | ||||||
В течение трансфузии | Через 1 час | Через 2 часа | Через 3 часа (для амбул. б-ных) | Общий анализ мочи от _________ | Анализ крови от ________ | Суточный диурез | |
Жалобы | Введено Выделено | ||||||
Объективно | |||||||
АД | |||||||
Ps | |||||||
T°C | |||||||
Первая порция мочи: | |||||||
цвет | |||||||
кол-во |
Врач _______________________________________
Verte!
Место для вклеивания Место для вклеивания результатов
этикетки трансфузионной среды индивидуального подбора крови
Согласие реципиента
на операцию переливания компонентов крови
Я, ________________________________________________________________________
получил разъяснения по поводу операции переливания крови. Мне объяснены лечащим врачом цель переливания, его необходимость, характер и особенности процедуры, ее возможные последствия, в случае развития которых я согласен на проведение всех нужных лечебных мероприятий. Я извещен о вероятном течении заболевания при отказе от операции переливания компонентов крови.
Я также получил информацию об альтернативных методах лечения.
Беседу провел врач _______________ (подпись врача). «___»__________20 г.
Пациент согласился с предложенным планом лечения, в чем расписался собственноручно
______________________________________________ (подпись пациента)
или расписался ___________________________________________ (подпись, Ф.И.О.)
В случае, когда состояние гражданина не позволяет ему выразить свою волю, а медицинское вмешательство неотложно,
Решение консилиума врачей _________________________________
__________________________________
__________________________________
или подпись лечащего (дежурного) врача с последующим уведомлением должностных лиц медицинского учреждения ______________________________________
Инструкция по заполнению трансфузионной карты
1. На каждое переливание реципиенту компонентов крови, в том числе аутокрови, аутокомпонентов заполняется трансфузионная карта и вклеивается в медицинскую карту стационарного (амбулаторного) больного в виде трансфузионной карты.
2. На оборотной стороне трансфузионной карты регистрируется в установленной форме согласие реципиента на проведение трансфузии.
3. Номер трансфузионной карты указывается в соответствии с порядковым числом трансфузии реципиенту.
4. В раздел «Реципиент» вносится результат контрольной проверки перед трансфузией группы крови реципиента по системам АВО и Резус.
5. В строке «Трансфузионный анамнез» необходимо отразить количество трансфузий и реакций на них. В строке «Акушерский анамнез» — количество беременностей, родов, абортов, наличие самопроизвольных выкидышей, мертворождений, гемолитической болезни новорожденных.
6. В раздел «Донор» вносится результат контрольного переопределения группы крови донора по системе АВО. В случае переливания корректоров гемостаза и фибринолиза, а также средств коррекции иммунитета переопределение группы крови донора по системе АВО не требуется.
7. В раздел «Паспорт трансфузионной среды» данные об изготовителе, дате заготовке переписываются с этикетки трансфузионной среды. После окончания трансфузии этикетка открепляется от контейнера с компонентом крови и вклеивается на оборотную сторону трансфузионной карты.
8. В раздел «Перелита трансфузионная среда»:
— в строке «Наименование» указывается наименование компонента крови в соответствии с этикеткой;
— в строке «Индивидуальный подбор крови» указывается лаборатория, учреждение, специалистами которого выполнен индивидуальный подбор;
— в строке «Подготовка к переливанию» указывается способ, температура и продолжительность подготовки трансфузионной среды к переливанию;
— в строке «Фильтрация» указывается тип фильтра, его изготовитель;
— строка «Ресуспендирование» заполнятся при добавлении перед трансфузией в контейнер с компонентом крови 0,9% раствора натрия хлорида изотонического с указанием его объема, № серии и изготовителя.
— в строке «Объем» указывается объем перелитой трансфузионной среды.
9. Наблюдение за реципиентом осуществляется во время трансфузии и в течение двух часов после трансфузии. При проведении трансфузии в амбулаторных условиях продолжительность наблюдения увеличивается до трех часов.
Приложение 3
Направление на СПК (ОПК)
на определение групповой и резус — принадлежности, индивидуальный подбор
(нужное подчеркнуть)
Наименование ЛПУ____________________________ отделение___________________
Ф.И.О. врача, направившего образец крови__________________________________
Контактный телефон______________________________________________________
Ф.И.О. пациента__________________________________________________________
Дата и год рождения_______________ № медицинской карты __________________
Диагноз: _________________________________________________________________
Трансфузионный анамнез (кол-во трансфузий и реакции на них) __________________ __________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________
Акушерский анамнез (кол-во беременностей, кол-во родов, ГБН детей,
выкидыши, мертворождения, аборты) _______________________________________
_________________________________________________________________________
Результаты иммуногематологического исследования крови, полученные в ЛПУ:
Группа крови по АВО __________________________________
Резус — принадлежность ________________________________
Наличие антиэритроцитарных аллоантител________________
Наименование компонентов крови, необходимых для трансфузии___________________
____________________________________________________________________________
Дата_________________________________Подпись врача_________________________
Примечание: пробирка с образцом крови должна быть промаркирована (Ф.И.О. пациента, дата взятия крови, № медицинской карты).
Если Hb пациента ниже 70 г/л, для определения групповой и резус — принадлежности, проведения индивидуального подбора необходимо взять две пробирки:
1 пробирка с консервантом (3 мл),
2 пробирка без консерванта (5 мл).
Список сокращений
ЛПУ — лечебно-профилактическое учреждение
МЗ РТ — Министерство здравоохранения Республики Татарстан
МЗ РФ — Министерство здравоохранения Российской Федерации
ГБН — гемолитическая болезнь новорожденных
ОПК — отделение переливания крови
СПК — станция переливания крови
Пособие подготовлено зав. кафедрой анестезиологии-реаниматологии и трансфузиологии ГОУ ДПО КГМА Росздрава, профессором В.М.Белопуховым, доцентом кафедры анестезиологии-реаниматологии и трансфузиологии ГОУ ДПО КГМА Росздрава, к.м.н. Е.А.Сидоруком, ассистентами кафедры Р.С.Гадыльшиной, Л.Н.Сибгатуллиной, Э.Р.Хамидуллиной, к.м.н., С.Н. Тереховой, Т.В.Ивановой.
Рецензенты:
зав. кафедрой хирургических болезней № 1 с курсами онкологии, анестезиологии и реаниматологии ГОУ ВПО «КГМУ Росздрава», д.м.н., профессор Д.М. Красильников;
зав. кафедрой клинической анатомии и амбулаторно-поликлинической хирургии ГОУ ДПО «КГМА Росздрава», профессор В.В.Фаттахов.
Литература:
1. Донсков С.И., Мороков В.А., Дубинин И.В. Групповые антигены эритроцитов. Концепция совместимости. — М.: «ИП Скороходов», 2008. — 172 с.
2. Минеева Н.В. Группы крови человека. Основы иммуногематологии. — СПб.: ООО «А-принт», 2004. — 188 с.
3. Приказ МЗ РФ от 09.01.1998 № 2 «Об утверждении инструкций по иммуносерологии».
4. Приказ МЗ РФ от 25.11.2002 № 363 «Об утверждении Инструкции по применению компонентов крови».
5. Приказ МЗ РТ от 13.05.1999 № 367 «О мерах по предупреждению осложнений при переливании компонентов, препаратов крови, кровезаменителей».
6. Приказ МЗ РТ от 05.08.2004 №1135 «О совершенствовании работы по профилактике посттрансфузионных осложнений в учреждениях здравоохранения Республики Татарстан»
7. Приказ МЗ РТ от 27.04.2004 г. № 691 «О совершенствовании преконцепционной, пренатальной и постнатальной профилактики иммуноконфликтной беременности в Республике Татарстан».
8. Приказ МЗ РФ от 25.12.1997 г. №380 «О состоянии и мерах по совершенствованию лабораторного обеспечения диагностики и лечения пациентов в учреждениях здравоохранения Российской Федерации».
9. Приказ МЗ РТ от 16.07.2004 г. № 1047 «О порядке получения, учета и хранения компонентов крови».
10. Методические указания № 52001-109 МЗ РФ, РНИИ гематологии и трансфузиологии «Требования к проведению иммуногематологических исследований доноров и реципиентов на СПК и в ЛПУ», Санкт- Петербург, 2002 г.
11. Методические рекомендации МЗ РФ «Алгоритмы исследования антигенов эритроцитов и антиэритроцитарных антител в сложнодиагностируемых случаях», Санкт- Петербург, 2000 г.
12. Методическое письмо Минздравсоцразвития России от 10.10.2008 г. №15-4/3118-09 «О порядке проведения иммуногематологических исследований у беременных, рожениц, плодов и новорожденных».
13. Методические указания «Организация иммуносерологических исследований (определение группы крови и резус — фактора) больным в лабораториях лечебно-профилактических учреждений г. Самары и Самарской области».
14. Инструкция о порядке проведения иммуногематологических исследований пациентов в учреждениях здравоохранения Санкт-Петербурга, 2005 г.