Влияние «Димефосфона» на показатели антиоксидантной системы организма, содержание нитрит-иона в сыворотке крови у больных сахарным диабетом 2 типа, осложненного синдромом диабетической стопы


В работе приведены результаты изучения антиоксидантных свойств «Димефосфона» и влияние его на содержание нитрит-иона у больных сахарным диабетом 2 типа с синдромом диабетической стопы. Препарат увеличивает антиокислительную активность, активность церулоплазмина и снижает уровень первичных и вторичных продуктов перекисного окисления липидов, значительно повышает содержание нитрит-иона в сыворотке крови больных сахарным диабетом 2 типа с синдромом диабетической стопы.

Influence «Dimephosphone» on indicators of antioxidant system of the body, the content of nitrite ion in the blood serum of patients with diabetes mellitus type 2, complicating by the diabetic foot syndrome

The results of the study of antioxidant properties «Dimephosphone» and its influence on the content of nitrite ion in patients with diabetes mellitus type 2 with diabetic foot syndrome are presented. The drug increases the antioxidant activity, ceruloplasmin activity and reduces the level of primary and secondary products of lipid peroxidation, significantly increases the concentration of nitrite ion in the serum of patients with type 2 diabetes mellitus with diabetic foot syndrome.

Одной из актуальных проблем современной эндокринологии является проблема предупреждения развития хронических осложнений у больных сахарным диабетом 2 типа, в частности диабетической стопы, составляющей 25% осложнений. Диабетическая стопа относится к наиболее тяжелым осложнениям сахарного диабета, поскольку является частой причиной инвалидизации и смертности пациентов. Риск развития гангрены и ампутации нижних конечностей в 20 и в 15-40 раз чаще, чем в общей популяции соответственно [1].

Значительное внимание исследователей в последние годы привлекает роль процессов свободнорадикального окисления в патогенезе диабетических осложнений. Предпринимаются многочисленные попытки использования в лечении данной патологии различных лекарственных средств, обладающих свойствами антиоксидантов, таких как витамины А, Е, С, тиоктовая кислота и др. [2]. В то же время большинство используемых в клинической практике антиоксидантов нейтрализует часть свободных радикалов, не предупреждая их образование, то есть оказывают лишь кратковременный эффект. С другой стороны, для многих антиоксидантных средств, таких как витамины А, Е и С, был показан прооксидантный эффект in vivo [1, 2], что нежелательно при сахарном диабете. Упомянутые факты свидетельствуют об актуальности поиска новых возможностей в коррекции антиоксидантного статуса и лечении осложнений сахарного диабета.

При экспериментальных исследованиях Л.И. Анчиковой [3, 4], И.Х. Валеевой [5] было показано, что отечественный оригинальный препарат димефосфон обладает антиоксидантными свойствами и улучшает микроциркуляцию в различных органах и тканях животных (центральная нервная система, легкие, печень, селезенка, почки, сердце, щитовидная и поджелудочная железы) и вызывает расширение капиллярной сети.


Целью работы явилась оценка влияния «Димефосфона» на систему антиоксидантной защиты организма, состояние капиллярной сети глазного дна и содержание нитрит-иона в сыворотке крови больных сахарным диабетом 2 типа с синдромом диабетической стопы смешанной формы.

Материалы и методы исследования. Всего нами обследованы 93 человека: 33 практически здоровых лиц составили контрольную группу №1; 31 пациент включены в основную группу больных сахарным диабетом 2 типа с синдромом диабетической стопы смешанной формы; 29 пациентов с сахарным диабетом 2 типа с синдромом диабетической стопы смешанная форма составили контрольную группу №2.

Основная группа получала «Димефосфон» внутривенно капельно 15 мг/кг массы 2 раза в сутки в течение 10 дней. Пациенты контрольной группы № 2 получали «стандартную» терапию: трентал 2%-5,0 мл и тиоктацид 600 ед. внутривенно капельно №10. Клиническая картина, биохимические показатели изучались до и после курса лечения. Критерием включения являлось наличие сахарного диабета 2 типа с синдромом диабетической стопы смешанной формы.

Пациенты и контрольная группа здоровых были только женского пола. Средний возраст контрольной группы здоровых — 67,39 ± 0,86 лет, контроля 2 — 70,14 ± 1,36 лет, основной группы — 67,32 ± 1,29 лет.


Критерием исключения являлись наличие гнойно-некротических поражений, язвы и гангрены нижних конечностей, сахарный диабет 1 типа, хроническая почечная недостаточность, острый инфаркт миокарда, прогрессирующая и нестабильная стенокардия, стенокардия напряжения 3-4 класса, психические и онкологические заболевания, злоупотребление алкоголем, недостаточность кровообращения.

Для уточнения выраженности сенсомоторных расстройств проводились исследования: тактильной чувствительности с применением монофиламента весом 10 г Thio-Feel (ASTA MEDICA, Германия), порог температурной чувствительности с помощью идентификатора Thio-Therm (ASTA MEDICA, Германия), болевой чувствительности при помощи специальной тупой иглы Neurotips, вибрационной чувствительности с помощью градуированного камертона (128 Гц). Проходимость сосудистого русла проверялась по наличию пульса на a. dorsalis pedis, a. tibialis posterior, a. poplitea, a. femoralis, состояние капиллярной сети глазного дна визуально.

Помимо общепринятых клинико-лабораторных и инструментальных методов исследования изучалась:

Липидограмма (холестерин, триглицериды, ЛПНП, ЛПОНП, ЛПВП, коэффициент атерогенности) на анализаторе CIBA CORNING (USA) с использованием реактивов VITAL DIAGNOSTICS (USA).

Коагулограмма (фибриноген, фибринолитическая активность, толерантность плазмы к гепарину, тромботест, протромбин) cуховоздушным методом с использованием реактивов хлорида кальция, тромбопластина.

Гликемический профиль в капиллярной крови исследовался 7.00-11.00-16.00-21.00 часов глюкозооксидазным методом на анализаторе КФК 2 (Россия) с использованием реактива глюкоза-ФКД (Россия).

Первичные продукты перекисного окисления липидов (ПОЛ, гидроперекиси липидов, отн.ед.) в сыворотке крови измеряли спектрофотометрически по методу В.Б. Гаврилова, М.И. Мишкорудной (1983). Принцип метода основан на интенсивном поглощении конъюгированных диеновых структур в ультрафиолетовой области при длине волны 232-234 нм.

Вторичные продукты ПОЛ (малоновый диальдегид, мкмоль/л) определяли спектрофотометрически по методу В.Б. Гаврилова и др. (1987) в реакции с 2-тиобарбитуровой кислотой при длине волны 532 нм.

Содержание церулоплазмина в сыворотке крови (мг%) определяли по методу Э.В. Тен (1981). Принцип метода основан на окислении р-фенилендиамина церулоплазмином.

Суммарная антиокислительная активность сыворотки крови (%) определялась в желточных липопротеидах по методу Ю.Г. Азнабаевой (2001).

Нитрит-ион определяли по модифицированной методике K. Nithipaticom и других (1996) и I. Guevara и других (1998) с использованием реактива Грисса после восстановления нитрата в нитриты губчатым кадмием спектрофотометрически при длине волны 540 нм.

Состояние глазного дна определялось визуально окулистом.

Результаты исследования и их обсуждение. На фоне лечения препаратом «Димефосфон» выявлено улучшение субъективных и объективных параметров. При умеренно выраженной диабетической полинейропатии наступало улучшение и тесты вибрационной, температурной, тактильной, болевой чувствительности становились близки к норме.

Исходные показатели первичных продуктов перекисного окисления липидов (гидроперекиси липидов) в сыворотке крови контрольной группы здоровых, контрольной группы 2 и основной группы не отличались друг от друга ( здоровые — 7,84 ± 0,50, контроль 2 -7,62 ± 0,71, группа сравнения — 7,40 ± 0,57, р>0,5). После проведенного «стандартного» лечения в контрольной группе 2 не получено различий в содержании гидроперекисей у больных сахарным диабетом 2 типа с синдромом диабетической стопы ( исходно 7,62 ± 0,71, после лечения 6,10 ± 0,38, р>0,1). Применение «Димефосфона» внутривенно в течение 10 дней показало их снижение на 37%* от исходных ( исходно 7,40 ± 0,57, после лечения 5,40 ± 0,47, р<0,002). После курса лечения димефосфоном содержание гидроперекисей было снижено на 45,2%* по сравнению с контрольной группой здоровых ( после лечения основная группа 5,40 ± 0,47, здоровые — 7,84 ± 0,50, р<0,001).

При исследовании исходных показателей в сыворотке крови у больных сахарным диабетом 2 типа с синдромом диабетической стопы и здоровых вторичные продукты перекисного окисления липидов (малоновый диальдегид) практически не отличались друг от друга (здоровые — 1,95 ± 0,11, 2-й контроль — 2,04 ± 0,10, основная группа — 2,30 ± 0,17, р>0,5 и р>0,05 соответственно). После курса лечения «Димефосфоном» содержание малонового диальдегида снизилось на 34,2% (исходно — 2,3 ± 0,17, после лечения — 1,49 ± 0,11, р<0,001). Содержание малонового диальдегида после лечения в контрольной группе 2 не изменилось (исходно — 2,04 ± 0,10, после лечения — 1,90 ± 0,22, р>0,5). При сравнении показателей после лечения «Димефосфоном» по сравнению с группой относительно здоровых получено снижение вторичных продуктов ПОЛ на 33,6% ( здоровые — 1,95 ± 0,11, опыт после лечения — 1,49 ± 0,11, р<0,001).

При изучении исходных показателей суммарной антиокислительной активности сыворотки крови здоровых, контрольной группы 2 выявлено отсутствие существенной разницы (здоровые — 38,65 ± 1,56, контроль 2 — 40,83 ± 3,53, р>0,5), а при сравнении группы опытных пациентов получено снижение на 15,9% по сравнению с группой относительно здоровых ( здоровые — 38,65 ± 1,56, группа основная — исходно 32,49 ± 2,32, р<0,05) и тенденция к снижению на 20,4% по сравнению со 2-ой контрольной группой (2 контроль исходно — 40,83 ±3 ,53, основная группа исходно — 32,49 ± 2,32, р≥0,05). После курса лечения пациентов тренталом и тиоктацидом (контрольная группа 2) по сравнению с исходными результатами существенной разницы не получено ( исходно — 40,83 ± 3,53, после лечения — 39,05 ± 2,12, р>0,5). После курса лечения «Димефосфоном» антиокислительная активность увеличилась на 46,3% по сравнению с исходными результатами и на 23% по сравнению с контрольной группой здоровых (опыт исходно — 32,49 ± 2,32, основная группа после лечения — 47,54 ± 3,14, р<0,001, здоровые — 38,65 ± 1,56, р<0,001) и на 21,7% по сравнению с 2-ой контрольной группой (2 контроль после лечения — 39,05 ± 2,12, основная группа после лечения — 47,54 ± 3,14, р<0,05).

Исходные показатели активности церулоплазмина в сыворотке крови в различных группах не отличались между собой ( здоровые — 60,60 ± 1,68, контроль 2 — 60,45 ± 1,34, группа сравнения — 58,50 ± 1,26, р>0,5). После курса лечения пациентов контрольной группы 2 активность церулоплазмина в сыворотке крови не изменилась ( исходно — 60,45 ± 1,34, после лечения — 62,26 ± 1,27, р >0,5).

После внутривенных инфузий «Димефосфона» активность церулоплазмина повысилась на 14,2% (исходно — 58,50 ± 1,26, после лечения — 66,78 ± 1,42, р<0,001), при сравнении с группой здоровых повысилась на 10% и с контрольной группой 2 — на 7,3% (здоровые — 60,60 ± 1,68, основная группа после лечения — 66,78 ± 1,42, р<0,01, контроль 2 после лечения — 62,26 ± 1,36, р<0,05).

Исходное содержание нитрит-иона в сыворотке крови контрольной группы 2 и основной группы по сравнению с группой здоровых было снижено на 12,8% и на 24,9% соответственно ( здоровые — 51,85 ± 2,23, контроль 2 исходно — 41,57 ± 3,84, р <0,01; основная группа исходно -38,92 ± 3,66, р<0,002). После проведенного курса лечения «Димефосфоном» значительно увеличилось его содержание на 63,5% по сравнению с исходным показателем ( исходно — 38,92 ± 3,66, после лечения — 63,65 ± 3,60, р<0,001), по сравнению с контрольной группой здоровых содержание нитрит-иона увеличилось на 22,8% ( здоровые — 51,85 ± 2,23, основная группа после лечения — 63,65 ± 3,60, р<0,001), по сравнению с контрольной группой 2 повысилось на 26% (2 контроль после лечения — 50,50 ± 3,58, основная группа после лечения — 63,65 ± 3,60, р<0,02).Содержание нитрит-иона в сыворотке крови больных сахарным диабетом 2 типа в контрольной группе 2 после лечения не изменилось по сравнению с исходными показателями (контроль 2 исходно — 41,57 ± 3,84, после лечения — 50,50 ± 3,58, р>0,1).

Таким образом, в клинической практике подтверждены экспериментальные антиоксидантные свойства «Димефосфона» у больных сахарным диабетом 2 типа с синдромом диабетической стопы смешанной формы. «Димефосфон» снижает также первичные и вторичные продукты перекисного окисления липидов сыворотки крови, увеличивает активность церулоплазмина и суммарную антиокислительную активность в сыворотке крови. При использовании препарата повышается содержание нитрит-иона в сыворотке крови и улучшается капиллярный кровоток глазного дна.

Э.Р. Низамутдинова, Л.И. Анчикова, Л.Е. Славин, И.Х. Валеева

Казанская государственная медицинская академия

Низамутдинова Эльвира Робертовна — аспирант кафедры эндокринологии

Литература:

1.  Дедов И.И. Осложнения сахарного диабета (клиника, диагностика, лечение, профилактика). Москва, 1995.

2.  Балаболкин М.И. Клиническая эндокринология. Москва, 1998.

3.  Анчикова Л.И. Экспериментальное обоснование для клинического применения «Димефосфона» как тирео-тимоактивирующего средства: автореферат дисс. … доктора мед.наук. Казань, 1988.

4.  Анчикова Л.И., Валеева И.Х. Влияние «Димефосфона» на дыхание и окислительное фосфорилирование митохондрий. Материалы 1-ой Всероссийской конференции « Клинические и патогенетические проблемы нарушений клеточной энергетики». Москва, 1999.

5.  Валеева И.Х. Фармакологическая коррекция нарушений перекисного окисления липидов, вызываемых ксенобиотиками: автореферат дисс. …доктора биол. наук. Казань, 2004.